大鼠B細胞活化因子 (ELISA)試劑盒
簡要描述:產(chǎn)品名稱:大鼠B細胞活化因子 (ELISA)試劑盒主要成分:酶標板,試劑,標準品等產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T產(chǎn)品形狀:盒裝液體保存條件:2-8℃有效期:6個月檢測方法:酶聯(lián)免疫吸附法檢測波長:450nm研究領(lǐng)域:神經(jīng)生物學,新陳代謝,免疫學,其它研究運輸:快遞送貨上門,運輸保存條件苛刻產(chǎn)品可單獨送貨上門
- 產(chǎn)品型號:MLXK3047
- 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
- 更新時間:2023-02-21
- 訪 問 量:389
大鼠B細胞活化因子 (ELISA)試劑盒
大鼠B細胞活化因子 (ELISA)試劑盒
實驗條件的選擇
在 ELISA 中,選擇各種實驗條件很重要,包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)都可以用作固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、纖維素等。可以是孔板、試管、珠子等形式,常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無論是何種載體,使用前都可以進行篩選:包被等量的抗原,在相同的實驗條件下進行反應。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:當抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度好,一般要求pH在9.0~9.6之間在吸附過程中。吸附溫度、時間和蛋白質(zhì)的量也有一定的影響,一般4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的最佳濃度需要滴定:即在包被不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)后,在其他測試條件相同的情況下觀察陽性樣品的OD值.選擇 OD 值最高、蛋白質(zhì)含量最少的濃度。對于大多數(shù)蛋白質(zhì),通常為 1-10 μg/ml。
(3)酶標抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法滴定初始效價(見酶標抗體部分)。然后固定其他條件或采用“方陣法"(包被材料、待測樣品對照品和酶標抗體處于不同稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)中準確滴定工作濃度。
(4)酶底物和氫供體的選擇:氫供體的選擇要求便宜、安全、顯色反應明顯,但本身是無色的。一些供氫體(如OPD等)具有潛在的致癌作用,應予以保護。有條件的應選用非致癌、高靈敏度的供氫體,如TMB、ABTS等,都是比較滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿停止反應。通常底物作用時間為10-30分鐘。底物溶液必須新鮮配制,特別是在使用前應立即加入 H2O2。
安全
1. 避免直接接觸終止液和底物 A 和 B。如果接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗過程中請勿進食、飲水、吸煙或使用化妝品。
3. 請勿將試劑盒的任何組件帶入嘴中。
4. 試劑應按標簽說明儲存,并在使用前恢復至室溫。稀釋后的標準品應丟棄,不能儲存。
5、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,并存放在密閉容器中,以免變質(zhì)。
6. 其他不使用的試劑應包裝或覆蓋。不要混合不同批次的試劑。保修前使用。
7. 使用一次性吸頭以避免交叉污染。吸取終止液和底物 A 和 B 時,避免使用帶有金屬部件的移液器。
8. 使用干凈的塑料容器準備清潔液。使用前*混合試劑盒中的成分和樣品。
9、清洗ELISA板時,應充分拍干,不要將吸水紙直接放入ELISA反應孔中吸水。
10. 底物A應蒸發(fā),避免長時間開蓋。底物 B 對光敏感,避免長時間暴露在光線下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取 OD 值。
11. 試劑的添加順序應相同,以保證所有反應板孔的孵育時間相同。
12、按說明書中注明的加液時間、加液量和順序進行孵育操作。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
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