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大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白 (ELISA)試劑盒

簡要描述:產品名稱:大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白 (ELISA)試劑盒
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
產品規(guī)格:48T/96T
產品形狀:盒裝液體
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
檢測方法:酶聯免疫吸附法
檢測波長:450nm
研究領域:神經生物學,新陳代謝,免疫學,其它研究
運輸:快遞送貨上門,運輸保存條件苛刻產品可單獨送貨上門

  • 產品型號:MLXK3046
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-02-21
  • 訪  問  量:384
詳情介紹


大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白 (ELISA)試劑盒

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大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白 (ELISA)試劑盒

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實驗條件的選擇


在 ELISA 中,選擇各種實驗條件很重要,包括:


(1)固相載體的選擇:許多物質都可以用作固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、纖維素等??梢允强装?、試管、珠子等形式,常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無論是何種載體,使用前都可以進行篩選:包被等量的抗原,在相同的實驗條件下進行反應。


(2)包被抗體(或抗原)的選擇:當抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度好,一般要求pH在9.0~9.6之間在吸附過程中。吸附溫度、時間和蛋白質的量也有一定的影響,一般4℃18~24小時。蛋白質包被的最佳濃度需要滴定:即在包被不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)后,在其他測試條件相同的情況下觀察陽性樣品的OD值.選擇 OD 值最高、蛋白質含量最少的濃度。對于大多數蛋白質,通常為 1-10 μg/ml。


(3)酶標抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法滴定初始效價(見酶標抗體部分)。然后固定其他條件或采用“方陣法"(包被材料、待測樣品對照品和酶標抗體處于不同稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)中準確滴定工作濃度。


(4)酶底物和氫供體的選擇:氫供體的選擇要求便宜、安全、顯色反應明顯,但本身是無色的。一些供氫體(如OPD等)具有潛在的致癌作用,應予以保護。有條件的應選用非致癌、高靈敏度的供氫體,如TMB、ABTS等,都是比較滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿停止反應。通常底物作用時間為10-30分鐘。底物溶液必須新鮮配制,特別是在使用前應立即加入 H2O2。



安全性

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

10. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。



自備材料

1. 蒸餾水。

2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。



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