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1、ELISA試驗(yàn)的穩(wěn)定性問(wèn)題?
做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),結(jié)果老是重復(fù)性不上,相同的材料和相同的操作方法做出的結(jié)果就截然不同,上午做時(shí)其OD在1.5,下午做時(shí)就是0.9了,所以都沒(méi)有辦法下結(jié)論,為什么會(huì)差異這么大呀??
(1)多設(shè)平行空孔,請(qǐng)別人代勞,以判斷究竟是否操作問(wèn)題?
?。?)對(duì)于活性非常高的包被物和酶標(biāo)記物,如果第一次選擇的范圍恰好在其平臺(tái)位置邊緣,那么在重復(fù)的時(shí)候,每次取樣帶來(lái)的微量誤差就很容易導(dǎo)致大的偏差了,特別是線性比較好的原料試劑,這個(gè)就很正常了。建議每次取樣的時(shí)候只使槍尖一點(diǎn)點(diǎn)位于液面下,以免吸嘴外面沾有少量抗原or抗體or酶而使結(jié)果重復(fù)不上。